मशरूम किंगडम में फिर से शोक की घोषणा की गई है। राजा दुखी है और उसकी प्रजा भी, क्योंकि राजकुमारी को एक अज्ञात राक्षस द्वारा अपहरण कर लिया जाता है। बोसेर ने घोषणा की कि उनका इससे कोई लेना-देना नहीं है, जाहिर तौर पर खलनायक का एक प्रतियोगी था। भाइयों मारियो और लुइगी ने आंसू नहीं बहाए, लेकिन हमेशा की तरह इकट्ठा हुए और सड़क पर उतरे। उनके और आप-अनुभवी खिलाड़ियों के अलावा सुंदरता को बचाने वाला कोई नहीं है। खेल मारियो ब्रदर्स सहेजें राजकुमारी दर्ज करें और बंधक को पाने के लिए किसी भी, सबसे अकल्पनीय बाधाओं को दूर करने के लिए कुछ बहादुर लोगों की मदद करें। नायकों को खून के प्यासे मांसाहारी पौधों, खलनायक के गुर्गों का सामना करना होगा और सिक्के एकत्र करने होंगे।
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